Vores proteintjenester
Fermentering og cellekultur
Biomasseproduktion fra bakterie-, gær-, insekt- og pattedyrsceller til processer i stor skala
Proteinoprensning
Homogene og velkarakteriserede lægemidler sparer tid såvel som kræfter og ressourcer
Proteinkarakteristik
Individuelt design til løsning af specifikke problemer med proteinkarakterisering
Funktionelle tests og testudvikling
Protokol med påvisning af metoder til spektroskopi i UV og synlige områder, fluorescens eller luminescens spektroskopi
Udvikling af enzymimmunanalyse (ELISA)
Fra valg af testkomponenter til udvikling af en arbejdsprotokol
Proteinmærkning og konjugering
Udvikling af strategier til maksimering af den funktionelle aktivitet af modificerede proteiner
Fjernelse og test af endotoksiner
Ekspert tjeneste i mindre end 1 uge
Udvikling og produktion af antistoffer
Fra antigen generation til antistofkarakteriseringARVYS Proteins Inc. tilbyder mere
Leder du efter yderligere tjenester? Vi kan tilbyde endnu flere tjenester end opført på dette websted; ring til os for at se, hvordan vi kan hjælpe dig. Ved at udnytte de seneste fremskridt inden for proteinteknologi, bestræber ARVYS Proteins Inc. sig på at levere den højeste kvalitet af individuelle proteintjenester i branchen. Vi samarbejder med dig, analyserer dit projekt i planlægningsfasen og anvender flere af vores kombinationer, så du får de ønskede resultater.
Proteinekspression
Vores proteinekspressionstjenester inkluderer den seneste udvikling inden for proteinekspressionsteknologier i bakterie-, insekt- og pattedyrceller for at sikre effektiviteten og økonomien i din rekombinante proteinproduktion. Vi tilbyder en række proteinekspressionstjenester, der er målrettet mod specifikke mål, lige fra ekspression af mærkede proteiner til forskning til produktion af biofarmaceutiske produkter til klinisk brug. Ekspressionen af dit målprotein vil blive optimeret ved at udvikle en ekspressionskonstruktion med en codon-optimeret deoxyribonukleinsyreindsats, stærk promotor, effektiv ribosombinding og højt kopiantal og kombinere det med den rette vært. Højt niveau af proteinekspression afhænger også af proteinproduktets stabilitet, opløselighed og foldningsvej. Derfor vil vi optimere disse parametre for proteinekspression i tilfælde, hvor vi har brug for en sådan optimering.
Genteknologi
- gengenerering ved polymerasekædereaktion eller syntetisk
- subkloning til en passende vektor
- bekræftelse af deoxyribonukleinsyreindsættelse ved Sanger-sekventering
- isolering af plasmider og opbevaring af deoxyribonukleinsyre
- stedstyret mutagenese
Proteinekspression i bakterier
- optimering af kodoner til bakteriel ekspression og syntese af deoxyribonukleinsyre-insert-gener
- mutagenese af en eksisterende struktur
- generering af bakterielle ekspressionskonstruktioner i en vektor valgt eller specificeret af klienten;
- transformation til en passende vært og fremstilling af glycerolreserve kapacitet
- screeningundersøgelser for at bestemme den variant af proteinet, der har det bedste ekspression
- optimering af vækstbetingelser (vært, induktion, miljø, temperatur, additiver) for at stimulere ekspressionen af enten opløseligt protein eller inklusionslegemer
- vurdering af proteinekspression i opløselig form eller i form af inklusionslegemer ved hjælp af SDS-PAGE/Kumasi eller Western blot
- skalering af produktionen af bakteriepasta (for flere detaljer se afsnittet Fermentering og cellekultur)
- oprensning og isolering af inklusionsorganer
- oprensning af det rekombinante protein fra den opløselige fraktion af lysatet (for flere detaljer se afsnittet Oprensning af proteinet)
- oprensning af det rekombinante protein fra inklusionslegemer ved genfoldning (for yderligere detaljer, se afsnittet Proteinoprensning)
Baculovir-induceret ekspression af protein i insektceller
- kodonoptimering til ekspression og syntese af deoxyribonukleinsyreinsertionsgener i insektceller
- mutagenese af en eksisterende struktur
- subkloning af en deoxyribonukleinsyreindsats i en baculovirusvektor valgt eller specificeret af klienten
- generation, amplifikation og kloning af virussen ved at begrænse fortynding eller plakrensning;
- forberedelse af virusbeholdere med en høj titer;
- SDS-PAGE, Western, ELISA eller funktionel analyse af proteinekspression i henholdsvis cellelysater og konditionerede medier til intracellulære og secernerede proteinprodukter
- udskilt eller intracellulær ekspression i insektceller: sf9, sf21 og HiFive
- ekspressionsoptimering: MOI, kinetik, kulturmedier
- storskala af insektcellekultur til produktion af konditionerede medier eller cellesedimenter (for flere detaljer se afsnittet Fermentering og cellekultur)
- oprensning af rekombinante proteiner fra konditionerede medier eller cellesedimenter (for flere detaljer, se afsnittet Proteinoprensning)
Proteinekspression i gærceller
- optimering af kodoner til ekspression og syntese af deoxyribonukleinsyreinsertionsgener i gærceller
- subkloning af deoxyribonukleinsyreindsatsen i den valgte gærekspressionsvektor
- mutagenese af en eksisterende struktur
- generation af gærtransformanter
- screening af højtydende transformanter ved Western, ELISA eller funktionel analyse af ekspression i cellelysater
- intracellulær ekspression af membranproteiner i S. cerevisiae gærceller
- secerneret ekspression i Pichia gærceller
- undersøgelser af ekspressionsoptimering: sekretionssignal, værtsstamme, dyrkningsmedium
- storskala gærcellekultur til produktion af konditionerede medier eller cellepiller
- oprensning af rekombinant protein fra konditionerede medier eller cellesedimenter (for flere detaljer se afsnittene Fermentering og cellekultur, Proteinoprensning)
Proteinekspression i pattedyrsceller
- optimering af kodoner til ekspression og syntese af deoxyribonukleinsyreinsertionsgener i pattedyrceller
- mutagenese af en eksisterende struktur
- generation af konstruerer til ekspression af et protein i pattedyrceller i en vektor valgt eller specificeret af en klient
- fremstilling af plasmid deoxyribonukleinsyre (fri for endotoksin) til forbigående eller stabil transfektion
- undersøgelse i mindre skala for at vurdere ekspressionsniveauet for det rekombinante protein og/eller for at optimere betingelserne for forbigående transfektion
- forskellige muligheder for transiente transfektionsreagenser
- dannelse af stabile transficerede cellepuljer
- analyse af ekspression ved hjælp af SDS-PAGE, Western, ELISA eller funktionel analyse
- sekretorisk eller intracellulær ekspression i CHO-, HEK293-, HEK293E-celler eller kundeudvalgte celler
- betingelser for cellevækst i en fastgjort eller suspensionskultur
- storskala pattedyrs cellekultur til produktion af konditionerede medier eller cellepiller (se Fermentering og cellekultur for detaljer)
- oprensning af et rekombinant protein fra konditionerede medier eller cellesedimenter (for flere detaljer, se afsnittet Proteinoprensning)
Udvikling af stabile cellelinjer
Yderligere proteinekspressionstjenester inkluderer
- langtidsopbevaring af deoxyribonukleinsyre, glycerolbeholdere og vira
- opbevaring af celler: livmodercellebank (master cell bank), fungerende cellebank (working cell banking)
Fermentering og cellekultur
Kvaliteten af de råmaterialer, vi får ved at skalering af fermentation, definerer ofte en udrensningsstrategi eller endda rengøringssucces. Vores cellekulturtjenester sigter mod at maksimere r-proteinproduktion ved at optimere gæringsprocesser, og dette kan være et meget vigtigt rengøringstrin. Den tid og kræfter, vi bruger i dette trin, resulterer ofte i betydeligt kortere oprensningsprotokoller og højere udbytter af aktivt r-protein. Vores erfaring med en række højtydende cellelinier, cellekulturvæksttilstande, medieformuleringer, ekstraktion, fraktionering og proteinberigelsesteknikker giver os mulighed for at designe den mest optimale fremstillingsproces til dine udgangsmaterialer.
Storskala produktion af plasma deoxyribonukleinsyre
Storskala produktion af protein
- ljus konditionerede miljöer, som blev udviklet under dyrkning af pattedyrs-, gær- og insektceller
- sediment fra pattedyrsceller
- indsæt fra insektceller
- bakteriepasta
- gærpasta
- transit transfektion i pattedyrceller
- infektion af insektceller med baculovirus med høj titer
- reproduktion af stabilt udtrykkende celler fra insekter eller pattedyr
- vækst af suspensionscellelinjer i rystekolber og bølgebioreaktorer
- vækst af vedhæftede cellelinjer i hætteglas med flere felter og cellefabrikker
Varianter til celler lysis
- stemmeskuespil
- homogenisering
- solubilisering med detergenter
- behandling med hypotoniske opløsninger
- en kombination af ovenstående
Refoldingspanel til inklusionsorganer
Befæstning af målprotein med
- udfældning med ammoniumsulfat
- centrifugering i saccharose gradient
- differentiel ekstraktion af detergenter
- ekstraktion i Triton X-114
- behandling til opnåelse af membranpræparater
- fordeling, vask, solubilisering og genfoldning af inklusionsorganer
Koncentration af konditionerede miljøer og bufferudveksling igennem
- centrifugering
- tangential flow filtration (TFF)
Kvantitativ analyse af målproteinekspression
Proteinoprensning
Vi har fået vores erfaring med oprensning af kundedefineret protein gennem mange års arbejde med proteinlægemidler, lægemiddelmål, komponenter i biologiske systemer og biokemiske reagenser. Alle proteinoprensningstjenester begynder med analysen af målproteinets fysisk-kemiske og biologiske egenskaber, hvilken fører til udviklingen af de nødvendige procedurer til udvinding, oprensning og karakterisering. Vores oprensningsstrategi er rettet mod at opnå et homogent aktivt proteinpræparat i to til tre rensningsfaser. Dette mål opnås ved omhyggelig udvælgelse og optimering af adsorptionstrinnet og ved at inkludere et gelfiltreringstrin for at fjerne aggregater, nedbrydningsprodukter og andre forurenende stoffer ved at vælge bufferbetingelser, der stabiliserer biologisk aktivitet og forhindrer produktnedbrydning. Vi arbejder konstant med antistoffer, antigener, enzymer, vækstfaktorer, deoxyribonukleinsyrebindende proteiner, membranproteiner, blodproteiner og mange andre proteiner. Men de fleste proteiner kræver en individuel tilgang, og vi er sikre på, at vi kan håndtere dit protein. Vi renser og karakteriserer det omkostningseffektivt efter dine specifikationer og leverer det til dig i en aktiv form, der passer til din ansøgning.
Særlige egenskaber ved oprensning af proteinet bestilt af klienten
- rengøring
- fusion og mærkede proteiner fra rekombinante kilder
- native proteiner fra naturlige kilder
- antistoffer af forskellige isotyper, herunder IgM
- membranproteiner
- Proteinrensningsskalaer varierer normalt fra 0,001 g til 5 g
- Proteiner renses i henhold til den renhed, der er specificeret af klienten
- Metoder til proteinoprensning med
- protokoller leveret af klienten
- offentliggjorte protokoller
- korrigerede protokoller fra leveret eller offentliggjort af kunden
- de novo-protokoller, der er tilpasset klientens krav
- kan anvendes enhver fremgangsmåde til proteinoprensning
- ionbytningskromatografi
- gelfiltrering
- affinitetskromatografi (bredspektret)
- kromatografi, som er baseret på hydrofob interaktion
- genfoldning fra inklusionsorganer
- udvikling af en proteinrensningsmetode til overførsel til en GMP-plante
- dedikerede kolonner bruges i hvert projekt
- effektivitet leveres gennem automatisering og præcision af AKTA-systemer fra Amersham BioSciences (nu GE)
Analyse af proteiner i mellemliggende og sidste stadier af oprensning
- normalt anvendes SDS-PAGE og/eller dot/Western blot-analyse til fraktionsanalyse
- proteinets renhed i det sidste rensningsstadium bestemmes ved densitometri af farvede Coomassie-geler
- det endelige produkt er udstyret med et analysecertifikat, en rengøringsrapport og om nødvendigt en batchproduktionsprotokol
Alle oprensede proteiner lavet på bestilling
- udstyret med et analysecertifikat, der er tilpasset kundens specifikationer (for flere detaljer se afsnittet Proteinkarakterisering)
- leveres i den krævede proteinkoncentration
- er i en buffer, der beskytter proteiner mod nedbrydning på grund af proteolyse, oxidation og forskydningsspænding
- doseres i størrelser af alikvoter, der er specificeret af klienten
Yderligere proteinoprensningstjenester inkluderer
- genfoldning af protein
- fjernelse af endotoksiner (for flere detaljer se afsnittet Fjernelse af endotoksiner)
- fjernelse af tags
- mærkning og konjugering (for flere detaljer se afsnittet Mærkning og konjugering af proteiner)
Proteinkarakteristik
Analytisk karakterisering giver sikkerhed for proteinets identitet, renhed, strukturelle og konformationsmæssige integritet og funktion. Vi udfører en række rutinemæssige proteinanalyser i alle faser af et projekt. Om nødvendigt kan vi bruge yderligere metoder til at karakterisere prøverne. Vi tilbyder også specialiserede tjenester til karakterisering af oprensede proteiner
Analyse af rå, mellemliggende og endelige proteinprodukter
- elektroforese (SDS-PAGE, native PAGE, isoelektrisk fokus-PAGE, PAGE med BUN)
- Western blot/dot-blot
- analyse af enzymaktivitet ved hjælp af lysabsorption eller fluorescens
- ELISA (direkte eller sandwich) - ELISA-udvikling
- proteinanalyse (A280, Bradford test eller tilsvarende)
- isotypning af antistoffer
- måling af endotoksiner - du kan anmode om endotoksintest
- analyse af forurenende deoxyribonukleinsyre
- absorptionsspektrum i UV/synligt område
Forberedelse og tilvejebringelse af proteinprøver til
- aminosyreanalyse
- N-terminal analyse
- massespektrometrisk identifikation og analyse
- bestemmelse af udryddelseskoefficienten
Proteinkarakteristik
- analytisk gelfiltrering (estimering af nativ molekylvægt, aggregeringsanalyse)
- analytisk ionbytningskromatografi (oxidation)
- analyse af renhed ved densitometri
- absorptionsspektroskopi i UV og synligt område
- analyse af oxidations-, nedbrydnings- og aggregeringsprodukter
- analyse af proteindeglycosylering
- undersøgelse af interaktion med ligander ved hjælp af metoder til coimmunudfældning, spektroskopi eller kromatografi
Funktionelle tests og testudvikling
Vi tilbyder vores erfaring med funktionelle tests og testdesign til detaljeret målproteinforskning, bioanalytiske målinger og screening med høj kapacitet. Fordi vi omhyggeligt karakteriserer de materialer, som testen er designet til, har vores tests maksimale signalvinduer og lav variation og er økonomiske. Disse tests kan have en række anvendelser, såsom analyse af enzymaktivitet, binding af små molekyler til proteiner, protein-protein-interaktioner og nukleinsyre-protein-interaktioner. Derudover tilbyder vi også vores tjenester til at outsource dine tests eller undersøgelser.
Analyse af funktionel aktivitet
- bindende interaktioner: protein-protein, protein-nukleinsyre, protein-lille molekyle eller peptid
- receptor funktionel analyse
- enzymatisk aktivitet
- direkte, indirekte, sandwich og konkurrencedygtig ELISA; ELISA udvikling
- hæmning
Testformater
- 96-hul tabletten
- enkelt prøve (til analyse af absorption i ZF/synligt område)
- HTS (high-throughput screening, yderst effektiv screening) -kompatibel
Foretrukne detektionsmetoder
- fluorescensintensitet
- polarisering af fluorescens
- overførsel af fluorescerende resonansenergi (FRET)
- luminescens
- lysabsorption
Testmål
- enzymer
- antistoffer
- receptorer
- hæmmere
- peptider
- små molekyler
Endelige analyseresultater
- karakteristisk for bindingsstedet (Bmax og Jd)
- bestemmelse af stationære kinetiske parametre for enzymet (Km og Vmax)
- inhibitorens egenskaber
- enkeltpunktshæmning for flere hæmmere ved en specificeret koncentration
- bestemmelse afIC50 og Ki
- analyse af hæmningskinetik med stærk binding
- bestemmelse af koncentrationen af proteiner, peptider og små molekyler
ELISA udvikling
Det enzymbundne immunosorbent assay (ELISA) er en udbredt test inden for diagnostik, lægemiddelforskning, klinisk udvikling og andre grene inden for biovidenskab. Det er en følsom test, der detekterer og kvantificerer et målmolekyle i biologiske væsker eller opløsninger. ELISA kan udføres i en række forskellige formater og platforme. Men det specifikke antistof mod målet er ELISA's vigtigste reagens, og andre komponenter er også kritiske for testens effektivitet. Vores mange års integrerede ekspertise inden for antistof og antigenbiokemi, funktionelle analyser, rekombinant proteinproduktion, hybridomacellekultur, antistofrensning og antistofkarakterisering og konjugering gør det muligt for os at tilvejebringe et fuldt optimeret og valideret ELISA til dets tilsigtede slutbrug.
ELISA TYPES
- direkte
- indirekte
- sandwich
- konkurrencedygtig
- hæmmende
Metoder til signaldetektering i ELISA
- absorption i det synlige område
- fluorescens
- luminescens
ELISA-udvikling inkluderer et valg af:
- testformat
- et antistof eller et par antistoffer
- standarder
- kemi til påføring af antigen/antistof på pladen
- buffere til blokering og vask
- detektionsstrategi
- reagenser til påvisning
ELISA-optimering inkluderer:
- koncentration af antistoffer, prøver og buffere
- applikationsprotokoller for antigen/antistof
- detektionsprotokoller
- dobbelt titrering (titrering såsom et skakbræt, chessboard titrations)
ELISA-valideringsparametre testes:
- pålidelighed/nøjagtighed/troværdighed
- usikkerhed
- kvantificeringsgrænse
- områdets linearitet fortynding
- reproducerbarhed af paralleller
- kvalitetskontrol af kalibratorer
- selektivitet
- prøve stabilitet
Proteinmærkning og konjugering
Mærkede proteiner gør det muligt for os at studere specifikke molekylære interaktioner med høj følsomhed i komplekse biologiske systemer. De er vigtige reagenser i adskillige biologiske anvendelser, såsom prøverne, proteinoprensning, ekspressionsundersøgelser af matrixribonukleinsyrearrayer, vævslokaliseringsundersøgelser, flowcytometri, klinisk billeddannelse og mere. Kvaliteten af de mærkede proteiner er afgørende for at opnå stabile og pålidelige data. Imidlertid synes mærkningsprocedurerne for os enkle og utvetydige, men de fleste af dem skal stadig justeres under hensyntagen til proteinets art for at opnå de ønskede resultater. Potentielle problemer under mærkningsprocedurer inkluderer proteintab på grund af udfældning, proteinhåndtering og ustabilitet, irreproducerbart forhold mellem etiket og protein, ufuldstændig fjernelse af ukonjugeret probe og utilstrækkelig proteinkarakterisering før og efter mærkning. Derudover er der opstået nye stedstyrede mærkningsteknologier, der kræver integration i mærkningsprocessen, ekspression og proteinoprensning. Vi har lang erfaring med forskellige proteinmærkningsmetoder og er sikre på, at vi kan give dig mærkningsreagenser af høj kvalitet til dine efterfølgende applikationer.
Ikke-selektiv proteinmærkning
- biotinylering med inklusionsforhold bestemt ved analysemetode baseret på HABA (4'-hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid)
- konjugering med fluorescerende prober med inklusionsforhold bestemt af fluorescens
- andre kemiske grupper (f.eks. Sulfo-tags, farvestoffer) med forhold af indeslutninger bestemt ved UV og synlig spektroskopi
- konjugering af enzymer med inklusionsforhold bestemt af enzymaktivitet
Stedspecifik tagging
- C-terminal mærkning med "Sortagging" (Sortase-medieret transpeptidering)
- N-terminal tagging med "Sortagging"
- mærkning på glykosyleringssteder
Mærkning med CLICK-kemi (CuAAC - Cu catalyzed alkyne azide cycloaddition, Cu--katalyseret alkyne-azid-cyklus-tilsætning)
- Azidomodificerede proteiner og/eller polysaccharider
- Alkynemodificerede proteiner og/eller polysaccharider
- Cu (I) -katalyseret Click-mærkning
- ikke-katalytisk Click-mærkning
- valg af Click--ordrepartnere, inklusive dobbelte tags
- applikationer in situ
- konjugering og påvisning af proteiner
Immobilisering af biomolekyler på hårde medier
- stedsspecifik målrettet immobilisering på en chip
- konjugering af protein med sorbent til kromatografi
Fjernelse og test af endotoksiner
Fjernelse af endotoksiner fra biologiske opløsninger er vigtig for mange anvendelser, såsom in vivo og cellulær, fordi endotoksiner interfererer med cellulære reaktioner. Endotoksiner er lipopolysaccharider, der findes i cellevæggen af gramnegative bakterier. Endotoksiner frigives fra bakterier under lysis. Den toksiske virkning af endotoksiner er baseret på deres interaktion med specifikke receptorer på immunceller, hvilket fører til frigivelse af høje koncentrationer af cytokiner og andre molekyler af immunologisk betydning. På grund af det faktum, at lejlighedsvise endotoksiner er til stede i luft, vand, på laboratorieglasvarer og ikke kan fjernes ved simpel sterilisering, er det næsten umuligt at opnå løsninger uden endotoksiner uden en procedure til fjernelse af dem. Hvert endotoksin-fjernelsesprojekt kræver et protokoludviklingstrin, der tager hensyn til målmolekylets biofysiske egenskaber, slutanvendelsen af prøven og den ønskede formulering. I mange år har vi med succes udviklet protokoller til fjernelse af endotoksin til at imødekomme strenge restkrav til endotoksin. Vi er overbeviste om, at vi vil gennemføre dit projekt til fjernelse af endotoksin med stor succes.
Fjernelse af endotoksiner fra vandige opløsninger efter rækkefølgen:
- proteiner
- Deoxyribonukleinsyre
- peptider
- biomasse
Metoderne er baseret på:
- opladning
- hydrofobicitet
- kombination af ladning og hydrofobicitet
- forhold til ligander
- størrelse
Tjenestens funktioner:
- proteintab minimeres ved at vælge den nødvendige metode til at fjerne endotoksiner og optimere det
- skalaer varierer fra mg til g af målmolekylet
- endotoksinfrie prøver steriliseres og fordeles i flere alikvoter for nemheds skyld
- prøver leveres i en buffer, der er kompatibel med applikationen
- vilkårene for afslutning af arbejdet i de fleste tilfælde er mindre end 1 uge - bede om priser til endotoksinanalyse
- detergentforligeligt r-faktor C-ftuorescensforsøg
- påviselige niveauer under 0,01 EU / ml
- kinetisk LAL-test og andre endotoksinassays tilgængelige
Udvikling og produktion af antistoffer
: I løbet af de sidste 30 år er antistoffer blevet meget vigtige reagenser inden for forskning, diagnose og medicin. Denne klasse af molekyler anvendes i øjeblikket meget i mange områder af biomedicinsk forskning, såsom immunanalyser (Western-blott, ELISA osv.), Proteinoprensning, proteinidentifikation og protein-protein-interaktionsundersøgelser. Mange kommercielle diagnostiske sæt indeholder antistoffer som væsentlige komponenter. Der er nu 75 monoklonale antistoffer eller deres derivater, der er godkendt af det amerikanske FDA, og mange flere testes i kliniske forsøg. Hvert antistofprojekt kræver en individuel metode til at indsamle alle fakta om antigenet og bestemme egenskaberne af det endelige antistof. Vi har en meget stor og langsigtet erfaring med udvikling og produktion af antistoffer til vores kunder. Vi vil udvikle en grundig plan for dit antistofdesignprojekt for at opnå de ønskede resultater.
Oprensning af kroppe fra biologiske kilder
- alle isotyper af antistoffer fra enhver dyreart
- fjernelse af endotoksiner fra antistofopløsninger
- konjugering af antistoffer med fluorescerende farvestoffer eller enzymer
- karakterisering af antistoffer ved ELISA og andre analyser
Produktion af rekombinante antistoffer i pattedyrsekspressionssystemer ved forbigående eller stabil transfektion
Opnåelse af monoklonale antistoffer fra hybridomacellelinier
Opnåelse af polyklonale antistoffer
- udvikling af antigen med immunogene egenskaber
- produktion, produktion og oprensning af antigener
- analyse af blodserum for specificitet ved ELISA og/eller Western blotting
- oprensning af antistoffer fra blodplasma
Produktion af enkeltkædede antistoffer (scFv) og Fab-fragmenter i E.COLI
- udvikling af et ekspressionsdesign
- udtryk i E. coli og dets optimering
- oprensning af antistoffer
Generering af Fab I (Fab) 2-fragmenter fra antistoffer i fuld størrelse
- optimering af den enzymatiske nedbrydningsreaktion
- fjernelse af fragmenter af den tunge kæde
- rengøring af Fab og (Fab) 2
Fagvisning til generering af monoklonale antistoffer
- dannelse af et fagdisplaybibliotek med antistoffer fra inficerede / syge patienter eller dyr immuniseret med antigen
- panorering og screening af fagvisning
- sekvensanalyse
- dannelse af scFv, Fab eller hele immunglobuliner i forskellige ekspressionssystemer
Karakterisering af antistoffer for specificitet og selektivitet


















