Nos services d’expression de protéines intègrent les derniers développements dans les technologies d’expression bactérienne, de baculovirus et de mammifères afin de vous garantir que votre production de protéines recombinantes sera efficiente et économique. Nous offrons plusieurs services d’expression de protéines adaptés à vos objectifs particuliers, allant de l’expression de protéines marquées à visée recherche à la production de produits biopharmaceutiques pour un usage clinique. Votre expression personnalisée de protéines sera optimisée en concevant une construction d’expression avec un insert d’ADN optimisé pour les codons, un promoteur fort, un site de liaison ribosomique efficace, un nombre de copies élevé et en le combinant avec un hôte approprié. Un niveau élevé d’expression des protéines dépend également de la stabilité, de la solubilité et de la voie de repliement du produit protéique. Par conséquent, nous optimiserons ces paramètres d’expression des protéines lorsqu’une telle optimisation est nécessaire.
: La qualité des matières premières issues de la mise à l’échelle de la fermentation détermine souvent la stratégie de purification voire le succès de la purification. Nos services de culture cellulaire visent à atteindre une production maximale de protéines R par le biais de l’optimisation des processus de fermentation et cela pourrait être une étape de purification très importante en soi. Le temps et les efforts consacrés à ce stade aboutissent souvent à des protocoles de purification considérablement plus courts et à des rendements plus élevés de protéine R active. Notre expérience avec diverses lignées cellulaires à haut rendement, les modes de croissance des cultures cellulaires, les formulations de milieux, les méthodes d’extraction, de fractionnement et d’enrichissement des protéines nous permet de concevoir le procédé de production le plus optimal pour vos matières premières.
Nos compétences en matière de purification personnalisée de protéines ont été acquises au fil de nombreuses années de travail avec des produits pharmaceutiques protéiques, des cibles thérapeutiques, des composants de systèmes biologiques et des réactifs biochimiques. Tous les services de purification de protéines commencent par l’analyse des propriétés physico-chimiques d’une protéine cible, aboutissant au développement de procédures personnalisées pour son extraction, sa purification et sa caractérisation. Notre stratégie de purification vise à obtenir une préparation homogène de protéines actives en deux à trois étapes de purification. Cet objectif est atteint par une sélection approfondie et une optimisation de l’étape de capture, l’incorporation d’une étape de filtration sur gel pour éliminer les agrégats, les produits de dégradation et autres contaminants, la sélection de conditions tampons qui stabilisent l’activité biologique et préviennent la dégradation du produit. Nous travaillons régulièrement avec des anticorps, des antigènes, des enzymes, des facteurs de croissance, des protéines de liaison à l’ADN, des protéines membranaires, des protéines sanguines et bien d’autres. Bien que la plupart des protéines exigent une approche individuelle, nous sommes convaincus que nous pouvons traiter vos protéines. Nous le purifierons à moindre coût, le caractériserons selon vos spécifications et vous le livrerons sous une forme active et compatible avec les applications.
SDS-PAGE et / ou dot / Western blot sont couramment utilisés pour l’analyse de fraction. La pureté finale des protéines est déterminée par densitométrie à partir des gels colorés au Coomassie. Les produits finaux sont fournis avec un certificat d’analyse, un rapport de purification et, le cas échéant, un enregistrement de lot
La caractérisation analytique garantit l’identité, la pureté, l’intégrité structurelle et conformationnelle et la fonction de la protéine. Nous effectuons un certain nombre d’analyses de protéines de routine à toutes les étapes du projet. Si nécessaire, nous pouvons soumettre vos échantillons à des méthodes supplémentaires de caractérisation. Nous offrons également des services spécialisés de caractérisation des protéines pour les protéines purifiées.
Nous offrons notre expérience en matière de tests fonctionnels et de développement de tests visant à réaliser des études mécanistiques détaillées d'une protéine cible, des mesures bioanalytiques et un criblage à haut débit. Étant donné que nous caractérisons minutieusement les substances pour lesquelles un test est développé, nos tests offrent des fenêtres de signal maximisées et sont économiques. Ces tests ont des champs d'application variés tels que l'analyse des activités enzymatiques, la liaison de petites molécules aux protéines, les interactions protéine-protéine et les interactions acide nucléique-protéine. En outre, nous proposons nos services pour externaliser vos tests ou vos études mécanistiques.
Le test immune-enzymatique (ELISA) est un test largement utilisé dans le diagnostic, la découverte de médicaments, le développement clinique et d’autres industries des sciences de la vie. Il s’agit d’un test sensible qui détecte et quantifie une molécule cible dans des liquides ou solutions biologiques. ELISA peut être effectué dans différents formats et plates-formes. Bien qu’un anticorps spécifique à une cible soit l’aspect central d’un ELISA, d’autres composants sont également essentiels pour les performances du test. Notre expertise transparente et intégrée en biochimie anticorps-antigène, analyses fonctionnelles, production de protéines recombinantes, culture cellulaire d'hybridomes, purification d’anticorps, caractérisation et conjugaison nous permet de fournir un ELISA entièrement optimisé et validé pour son application finale prévue.
Les protéines marquées nous permettent d’étudier des interactions moléculaires spécifiques avec une sensibilité élevée dans des systèmes biologiques complexes. Ce sont des réactifs importants dans de nombreuses applications biologiques telles que les dosages, les purifications, les réseaux protéiques, les études de localisation, la cytométrie en flux, l’imagerie clinique et bien plus encore. La qualité des protéines marquées est essentielle pour des données cohérentes et fiables. Bien que les procédures de marquage semblent simples et directes, la plupart d’entre elles doivent encore être ajustées pour prendre en considération la nature d’une protéine afin d’obtenir les résultats souhaités. Les problèmes possibles au cours des procédures de marquage comprennent les pertes de protéines dues à la précipitation, à la manipulation et à l’instabilité des échantillons, au rapport marqueur / protéine incohérent, à l’élimination incomplète d’une sonde de marquage non conjuguée et à une mauvaise caractérisation des protéines avant et après le marquage. En outre, de nouvelles technologies de marquage sont apparues pour le marquage dirigé vers un site nécessitant une intégration de l’expression et de la purification des protéines dans le processus de marquage. Nous avons une vaste expérience avec diverses techniques de marquage des protéines et sommes convaincus que nous pouvons vous fournir des réactifs marqués de haute qualité pour vos applications en aval.
Élimination des endotoxines des solutions biologiques est essentielle pour de nombreuses applications in vivo et cellulaires, car elle interfère avec la réponse biologique. Les endotoxines sont des polysaccharides qui se trouvent dans la paroi cellulaire externe des bactéries Gram-négatives. Ces bactéries libèrent des endotoxines au moment de la lyse. L’effet toxique des endotoxines est déclenché par son interaction avec des récepteurs spécifiques sur les cellules immunitaires entraînant la libération de concentrations élevées de cytokines et d’autres molécules d’importance immunologique. Étant donné que l’endotoxine accidentelle est présente dans l’air, l’eau, le matériel de laboratoire et qu’elle ne peut pas être éliminée par une simple stérilisation, il est presque impossible de produire des solutions sans endotoxine sans procédure d’élimination. Chaque projet d’élimination des endotoxines exige une étape de développement de protocole qui prend en considération les propriétés biophysiques d’une molécule cible, l’application finale de l’échantillon et la formulation désirée. Pendant des années, nous avions développé avec succès des protocoles d’élimination des endotoxines pour répondre aux exigences strictes en matière de présence d’endotoxines. Nous sommes convaincus que nous pouvons faire de votre projet d’élimination des endotoxines un succès.
Au cours des 30 dernières années, les anticorps sont devenus des réactifs très importants dans la recherche, le diagnostic et la médecine. Cette classe de molécules est aujourd’hui largement utilisée dans de nombreux domaines de la recherche biomédicale tels que les immunoessais (Western blot, ELISA, etc.), la purification des protéines, l’identification des protéines et les études d’interaction protéine-protéine. De nombreux kits de diagnostic commerciaux sont des anticorps comme composants essentiels. Actuellement, il existe 75 anticorps monoclonaux ou leurs dérivés approuvés par la FDA et de nombreux autres sont en cours de test dans des études cliniques. Chaque projet d’anticorps exige une approche personnalisée rassemblant tous les faits sur un antigène et définissant les propriétés de l’anticorps final. Nous avons une longue histoire dans le développement et la production d’anticorps pour nos clients. Nous planifierons soigneusement votre projet d’anticorps pour atteindre les résultats désirés.