Custom Protein Science Services
Ons bedrijf –ARVYS Proteins Inc. – is een organisatie voor contractonderzoek (CRO) die gespecialiseerd is in recombinante en natuurlijke proteïnen voor verschillende onderzoeken op het gebied van natuurwetenschappen, in het bijzonder op het gebied van de ontwikkeling van geneesmiddelen. Onze ruime ervaring in de chemie van proteïnes, in het werken met systemen voor de productie van recombinante eiwitten van verschillende soorten, evenals onze uitgebreide kennis van moderne biotechnologie stellen ons in staat om een betrouwbare en vindingrijke partner voor onze klanten te worden. Onze klanten zijn farmaceutische en biotechnologische bedrijven, universiteiten en wetenschappelijke centra. We begeleiden u graag in elk stadium van een onderzoeksproject met betrekking tot eiwitten. Ons doel is om uw belangrijkste partners te worden op het gebied van werken met eiwitten, en we zullen ons uiterste beste doen om uw vertrouwen te winnen.

ONZE DIENSTEN MET BETREKKING TOT EIWITTEN

Protein Expression

Eiwitexpressie

Genereren van heterologe recombinante eiwitten in verschillende systemen van expressie
Fermentation & Cell Culture

Fermentatie en celcultuur

Productie van biomassa uit cellen van bacteriën, gist, insecten en zoogdieren voor grootschalige processen
Protein Purification

Eiwitzuivering

Homogene en welbepaalde preparaten besparen tijd, moeite en middelen
Protein Characterization

Karakterisering van eiwit

Individueel ontwerp voor de oplossing van specifieke taken op het gebied van de karakterisering van eiwit
Functional Assays and Assay Development

Functionele testen en de ontwikkeling van testen

Protocollen met detectie door middel van spectroscopie in UV- en zichtbare gebieden, fluorescentiespectroscopie of luminescentiespectroscopie
ELISA Development

Ontwikkeling van ELISA

Van het kiezen van testonderdelen tot het ontwikkelen van het operationele protocol
Protein Labeling and Conjugation

Labeling en conjugatie van eiwitten

Ontwikkeling van strategieën om de functionele activiteit van gemodificeerde eiwitten te maximaliseren
Endotoxin Removal and Testing

Verwijderen en testen van endotoxinen

Deskundige diensten binnen minder dan 1 week
Antibody Development & Production

Ontwikkeling en productie van antistoffen

Van de generatie van een antigeen tot de karakterisering van antistoffen

ARVYS Proteins Inc. biedt nog meer aan

Op zoek naar aanvullende diensten? Wij bieden nog meer diensten aan dan aangegeven op deze website; neem contact met ons op om te leren kennen hoe we u kunnen helpen. Door gebruik te maken van de nieuwste prestaties op het gebied van eiwittechnologieën, doet ARVYS Proteins Inc. zijn uiterste beste om de met eiwitten verbonden diensten van de hoogste kwaliteit in de branche te leveren. We werken nauw met u samen, analyseren uw project in het stadium van planning en gebruiken verschillende benaderingen om u de gewenste resultaten te bezorgen.
Diensten

Eiwitexpressie

Onze diensten met betrekking tot de expressie van eiwit bevatten de nieuwste technologieën op het gebied van expressie in cellen van bacteriën, insecten en zoogdieren om ervoor te zorgen dat uw productie van recombinante eiwitten efficiënt en kosteneffectief is. We bieden een reeks van met eiwitexpressie verbonden diensten aan die zijn ontworpen om aan specifieke doelen te voldoen: van de expressie van gelabelde eiwitten voor onderzoeken tot de productie van biofarmaceutische preparaten voor klinisch gebruik. De expressie van uw doeleiwit zal worden geoptimaliseerd door middel van de ontwikkeling van een expressieconstructie met een codon-geoptimaliseerde DNA-insert, met een sterke promoter, met een efficiënte ribosome binding site en een groot aantal kopieën, en dit te combineren met de juiste gastheer. Een hoog niveau van de expressie van een eiwit hangt ook af van de stabiliteit, oplosbaarheid en vouwing van het eiwitproduct. We zullen navenant deze parameters van eiwitexpressie optimaliseren in gevallen wanneer een dergelijke optimalisatie nodig is.

MEER DETAILS
TERUG NAAR BOVEN

GENTECHNOLOGIE

  • generatie de gen met behulp van PCR of op synthetische wijze
  • subklonen in een geschikte vector
  • bevestiging van de DNA-insert door middel van de Sanger sequencing
  • uitscheiden van plasmiden en bewaren van DNA
  • gerichte mutagenese

EXPRESSIE VAN EIWIT IN BACTERIËN

  • optimalisatie van codons voor de bacteriële expressie en synthese van genen van de DNA-insert
  • mutagenese van een bestaande constructie
  • generatie van de bacteriële expressieconstructie (constructies) in een door de klant gekozen of bepaalde vector
  • transformatie naar een geschikte gastheer en voorbereiding van glycerolvoorraden
  • screenings om de variant van het eiwit met de beste expressie te bepalen
  • optimalisatie van voorwaarden voor groei (gastheer, inductie, omgeving, temperatuur, additieven) om de expressie van oplosbaar eiwit of inclusielichamen te stimuleren
  • beoordeling van eiwitexpressie in oplosbare vorm of als inclusielichamen door middel van de methode van SDS-PAGE/Coomassie of Western blot
  • schaling van de productie van bacteriële pasta (voor meer informatie zie de sectie “Fermentatie en celcultuur”)
  • spoelen en uitscheiden van inclusielichamen
  • zuivering van het recombinante eiwit uit de oplosbare fractie van het lysaat (voor meer informatie zie de sectie “Eiwitzuivering”)
  • zuivering van het recombinante eiwit uit inclusielichamen door middel van hervouwing (voor meer informatie zie de sectie “Eiwitzuivering”)

DOOR HET BACULOVIRUS GEÏNDUCEERDE EXPRESSIE VAN EIWIT IN CELLEN VAN INSECTEN

  • optimalisatie van codons voor de expressie en synthese van genen van de DNA-insert in cellen van insecten
  • mutagenese van de bestaande constructie
  • subklonen van de DNA-insert naar de door de klant gekozen of bepaalde baculovirus-vector
  • generen, versterken en klonen van het virus door de beperkte teelt of zuivering van plakken
  • voorbereiding van virus-voorraden met een hoge titer
  • SDS-PAGE, Western blot, ELISA of de functionele analyse van eiwitexpressie in cellysaten en geconditioneerde media voor intracellulaire en gesecreteerde eiwitproducten respectievelijk
  • gesecreteerde en intracellulaire expressie in de cellen van insecten sf9, sf21 en HiFive
  • optimalisatie van expressie: MOI, kinetiek, groeimedia
  • grootschalige celcultuur van insecten voor de productie van geconditioneerde media of sedimenten van cellen (voor meer informatie zie de sectie “Fermentatie en celcultuur”)
  • zuivering van recombinante eiwitten uit geconditioneerde media of sedimenten van cellen (voor meer informatie zie de sectie “Eiwitzuivering”)

EXPRESSIE VAN EIWIT IN DE CELLEN VAN GIST

  • optimalisatie van codons voor de expressie en synthese van genen van de DNA-insert in de cellen van gist
  • subklonen van de DNA-insert in de gekozen of bepaalde gist-expressievector
  • mutagenese van de bestaande constructie
  • genereren van gist transformanten
  • screening van transformanten van hoge opbrengst door de methoden Western blot, ELISA of de functionele analyse van expressie in cellysaten
  • intracellulaire expressie van membraaneiwitten in de gistcellen S. cerevisiae
  • gesecreteerde expressie in de gistcellen Pichia
  • onderzoeken van de optimalisatie:van expressie: secretiesignaal, stam van de gastheer, cultuurmedium
  • grootschalige kweek van gistcellen voor de productie van geconditioneerde media of sedimenten van cellen
  • zuivering van recombinante eiwitten uit geconditioneerde media of sedimenten van cellen (voor meer informatie zie de secties “Fermentatie en celcultuur”, “Eiwitzuivering”)

EXPRESSIE VAN EIWIT IN CELLEN VAN ZOOGDIEREN

  • optimalisatie van codons voor de expressie en synthese van de genen van de DNA-insert in cellen van zoogdieren
  • mutagenese van de bestaande constructie
  • genereren van een constructie (constructies) voor eiwitexpressie in cellen van zoogdieren in een de door de klant gekozen of bepaalde vector
  • voorbereiding van een plasmide (vrij van endotoxinen) voor tijdelijke of stabiele transfectie
  • kleinschalig onderzoek om het niveau van de expressie van het recombinante eiwit te beoordelen en/of de voorwaarden voor tijdelijke transfectie te optimaliseren
  • verschillende varianten van reagentia voor tijdelijke transfectie
  • vorming van stabiel getransfecteerde celpools
  • analyse van expressie met behulp van SDS-PAGE, Western blot, ELISA of de functionele analyse
  • gesecreteerde of intracellulaire expressie in de cellen van CHO, HEK293, HEK293E of in de door de klant gekozen cellen
  • voorwaarden voor de groei van cellen in de gehechte of suspensiekweek
  • grootschalige kweek van cellen van zoogdieren voor de productie van geconditioneerde media of sedimenten van cellen (voor meer informatie zie de sectie “Fermentatie en celcultuur”)
  • zuivering van recombinant eiwit uit geconditioneerde media of sedimenten van cellen (voor meer informatie zie de sectie “Eiwitzuivering”)

VERKRIJGEN VAN STABIELE CELLIJNEN

AANVULLENDE DIENSTEN IN VERBAND MET EIWITEXPRESSIE BEVATTEN ALS VOLGT:

  • langetermijnbewaren van DNA, glycerolvoorraden en virussen
  • bewaren van cellen: master cell bank, working cell banking

INFO VERBERGEN
LEES MEER
Diensten

Fermentatie en celcultuur

De kwaliteit van de materialen die als gevolg van de schaling van fermentatie worden verkregen, bepaalt vaak de strategie van de zuivering of zelfs het succes van de zuivering. Onze diensten in verband met de celkweek zijn erop gericht om de productie van het r-eiwit te maximaliseren door de optimalisatie van de processen van fermentatie, en dit kan op zichzelf een zeer belangrijke stap van de zuivering zijn. De tijd en moeite die in dit stadium besteed zijn, leiden vaak tot aanzienlijk kortere zuiveringsprotocollen en hogere opbrengsten van het actieve r-eiwit. Onze ervaring met verschillende cellijnen van hoge opbrengst, met groeimodi van celculturen, met samenstellingen van media, met de methoden van de extractie, fractionering en verrijking van eiwit, stelt ons in staat om het meest optimale productieproces voor uw bronmaterialen te ontwikkelen.

MEER DETAILS
TERUG NAAR BOVEN

GROOTSCHALIGE PRODUCTIE VAN PLASMIDE

GROOTSCHALIGE PRODUCTIE VAN EIWIT

  • geklaarde geconditioneerde media die verkregen zijn door het kweken van cellen van zoogdieren, gist en insecten
  • sedimenten van cellen van zoogdieren
  • pasta uit de cellen van insecten
  • bacteriële pasta
  • gistpasta
  • tijdelijke transfectie naar de cellen van zoogdieren
  • infecteren van de cellen van insecten met baculovirus met een hoge titer
  • kweken van stabiel expresserende cellen van insecten of zoogdieren
  • groei van suspensiecellijnen in schudflessen en WAVE bioreactors
  • groei van gehechte cellijnen in schudflessen en cellfabrieken

VARIANTEN VAN DE LYSE VAN CELLEN

  • ultrasonicatie
  • homogenisering
  • solubilisatie met behulp van detergenten
  • verwerking met hypotone oplossingen
  • combinatie van bovenstaande

PANEEL VAN DE HERVOUWING VAN INCLUSIELICHAMEN

VERRIJKING VAN DOELEIWIT MET BEHULP VAN

  • neerslaan met ammoniumsulfaat
  • centrifugeren met sacharosegradiënt
  • differentiële extractie met detergenten
  • extractie in Triton Х-114
  • verwerking om membraanpreparaten te verkrijgen
  • uitscheiden, spoelen, solubilisatie en hervouwing van inclusielichamen

CONCENTREREN VAN GECONDITIONEERDE MEDIA EN HET VERVANGEN VAN DE BUFFER DOOR MIDDEL VAN

  • centrifugeren
  • tangentiële stroomfiltratie (TFF)

KWANTITATIEVE ANALYSE VAN DE EXPRESSIE VAN DOELEIWIT


INFO VERBERGEN
LEES MEER
Diensten

Eiwitzuivering

Onze ervaring op het gebied van de zuivering van het eiwit dat bepaald is door de klant, is opgedaan tijdens veel jaren van werken met eiwit-geneesmiddelen, drugtargets, componenten van biologische systemen en biochemische reagentia. Alle diensten met betrekking tot eiwitzuivering beginnen met de analyse van de fysisch-chemische en biologische eigenschappen van het doeleiwit, wat leidt tot de ontwikkeling van gerichte procedures voor de extractie, zuivering en karakterisering van het eiwit. Onze strategie in verband met zuivering is gericht op het verkrijgen van een homogeen actief eiwitpreparaat in twee-drie stadia van zuivering. Dit doel wordt bereikt door een zorgvuldige selectie en optimalisatie van het stadium van adsorptie, door de opname van het stadium van gelfiltratie om aggregaten, afbraakproducten en andere verontreinigingen te verwijderen, door de selectie van buffer-voorwaarden die de biologische activiteit stabiliseren en de afbraak van het product voorkomen. We werken routinematig met antistoffen, antigenen, enzymen, groeifactoren, DNA-bindende eiwitten, membraaneiwitten, bloedeiwitten en veel andere eiwitten. Hoewel de meeste eiwitten een individuele benadering vereisen, zijn we zeker dat we uw eiwit zullen kunnen behandelen. We zullen het kosteneffectief reinigen, volgens uw specificaties karakteriseren en u in een actieve vorm leveren in overeenstemming met uw opdracht.

MEER DETAILS
TERUG NAAR BOVEN


BIJZONDERHEDEN VAN DE DOOR DE KLANT BESTELDE EIWITZUIVERING

  • zuivering
    • fusie van (fusie-) eiwitten en eiwitten met tags uit recombinante bronnen
    • van natieve eiwitten uit natuurlijke bronnen
    • van antistoffen van verschillende isotypes, met inbegrip van IgM
    • van membraaneiwitten
  • gewoonlijk variëren de schalen van eiwitzuivering van 0,001 g tot 5 g
  • eiwitten worden gezuiverd in overeenstemming met de door de klant bepaalde zuiverheid
  • methoden van eiwitzuivering met behulp van
    • door de klant verstrekte protocollen
    • gepubliceerde protocollen
    • gecorrigeerde protocollen die door de klant werden verstrekt of gepubliceerd
    • protocollen de novo die aangepast zijn aan de eisen van de klant
  • elke methode van eiwitzuivering kan worden gebruikt
    • ionenuitwisselingschromatografie
    • gelfiltratie
    • affiniteitschromatografie
    • chromatografie op grond van hydrofobe interactie
  • hervouwing uit inclusielichamen
  • ontwikkeling van een methode voor eiwitzuivering voor de verplaatsing van het eiwit naar een GMP-object
  • in elk project worden geselecteerde kolommen gebruikt
  • de efficiëntie wordt gewaarborgd door de automatisering en nauwkeurigheid van het systeem ÄKTA van Amersham BioSciences (nu GE)

ANALYSE VAN EIWITTEN IN DE TUSSENTIJDSE EN LAATSTE STADIA VAN DE ZUIVERING

  • voor de analyse van fracties worden routinematig SDS-PAGE en/of Dot /Western blotting gebruikt
  • de zuiverheid van het eiwit in het laatste stadium van de zuivering wordt bepaald door de densitometrie van met coomassie gekleurde gels
  • het eindproduct is voorzien van een analysecertificaat, een zuiveringsrapport en, indien van toepassing, een protocol voor de productie van de batch

ALLE OP OPDRACHT GEZUIVERDE EIWITTEN

  • zijn voorzien van een analysecertificaat dat aangepast is aan de specificaties van de klant (voor meer informatie zie de sectie “Karakterisering van eiwit”)
  • worden geleverd in de bepaalde concentratie van het eiwit
  • bevinden zich in een buffer die de eiwitten beschermt tegen afbraak door proteolyse, oxidatie en schuifspanning
  • worden gedoseerd in de door de klant bepaalde aliquots

AANVULLENDE DIENSTEN IN VERBAND MET EIWITEXPRESSIE BEVATTEN ALS VOLGT


INFO VERBERGEN
LEES MEER
Diensten

Karakterisering van eiwit

Analytische karakterisering zorgt voor de identiteit, zuiverheid, structurele integriteit en functie van het eiwit. We voeren een aantal routinematige analyses van het eiwit uit in alle stadia van het project. Indien het nodig is kunnen we aanvullende methoden gebruiken om de monsters te karakteriseren. We bieden ook gespecialiseerde diensten aan om gezuiverde eiwitten te karakteriseren.

MEER DETAILS
TERUG NAAR BOVEN


ANALYSE VAN ONGEZUIVERDE, TUSSENTIJDSE EN UITEINDELIJKE EIWITPRODUCTEN

  • elektroforese (SDS-PAGE, natief PAGE, iso-elektrisch focusseren -PAGE, PAGE met ureum)
  • Western blot/Dot blot
  • analyse van de activiteit van enzymen volgens lichtabsorptie of fluorescentie
  • ELISA (direct of sandwich)-ontwikkeling van ELISA
  • analyse van het eiwit (A280, Bradford-test of zijn equivalent)
  • isotypering van antistoffen
  • meting van endotoxinen – U kunt een “Test voor endotoxinen” aanvragen
  • analyse van verontreinigend DNA
  • absorptiespectrum op het UV/zichtbare gebied

VOORBEREIDING EN VERSTREKKING VAN MONSTERS VAN HET EIWIT VOOR

  • de analyse van aminozuren
  • N-terminus analyse
  • identificatie en analyse met massaspectrometrie
  • bepalen van extinctiecoëfficiënt

KARAKTERISERING VAN EIWIT

  • analytische gelfiltratie (beoordeling van de natieve moleculaire massa, aggregatieanalyse)
  • analytische ionenuitwisselingschromatografie (oxidatie)
  • analyse van zuiverheid door de methode van densitometrie
  • absorptiespectroscopie op het UV- en zichtbare gebied
  • analyse van de producten van oxidatie, afbraak en aggregatie
  • analyse van de deglycosylering van het eiwit
  • onderzoek van de interactie met liganden door middel van coimmunoprecipitatie, spectroscopie of chromatografie

INFO VERBERGEN
LEES MEER
Diensten

Functionele testen en de ontwikkeling van testen

We bieden onze ervaring in functionele testen en de ontwikkeling van testen aan voor een grondige studie van het doeleiwit, bioanalytische metingen en hoogwaardige screening. Omdat we de materialen waarvoor de test wordt ontwikkeld, zorgvuldig karakteriseren, hebben onze testen maximale signaalvensters en een lage variabiliteit, evenals zijn kosteneffectief. Deze testen kunnen verschillende toepassingen hebben, zoals de analyse van de activiteit van enzymen, van de binding van kleine moleculen met eiwitten, van eiwit-eiwit-interacties en interacties tussen nucleïnezuren en eiwitten. Bovendien bieden we onze diensten aan in het kader van de uitbesteding van uw testen of onderzoeken.

MEER DETAILS
TERUG NAAR BOVEN


ANALYSE VAN FUNCTIONELE ACTIVITEIT

  • bindende interacties: eiwit-eiwit, eiwit-nucleïnezuur, eiwit-klein molecuul of peptide
  • receptoren functionele analyse
  • enzymactiviteit
  • directe, indirecte, sandwich en concurrerende ELISA; ontwikkeling van ELISA
  • inhibitie

TESTFORMATEN

  • 96-wells-plaat
  • enkel monster (voor de analyse van absorptie op het UV/zichtbare gebied)
  • HTS (high-throughput screening, hoogwaardige screening)-compatibel

VOORGEKEURDE METHODEN VAN DETECTIE

  • intensiteit van fluorescentie
  • polarisatie van fluorescentie
  • fluorescence resonance energy transfer (FRET)
  • luminescentie
  • lichtabsorptie

TESTDOELEN

  • enzymen
  • antistoffen
  • receptoren
  • inhibitoren
  • peptiden
  • kleine moleculen

EINDRESULTATEN VAN DE ANALYSE

  • karakterisering van de bindende site (Bmax en Jd)
  • bepalen van stationaire kinetische parameters van het enzym (Km en Vmax)
  • karakterisering van de inhibitor
  • één-punt inhibitie voor verschillende inhibitoren bij een bepaalde concentratie
  • bepalen van IC50 en Ki
  • analyse van de kinetiek van de inhibitie met een vaste binding
  • bepalen van de concentratie van eiwitten, peptiden en kleine moleculen

INFO VERBERGEN
LEES MEER
Diensten

Ontwikkeling van ELISA

Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA) is een uitgebreid gebruikte test in de diagnostiek, in het onderzoek van geneesmiddelen, in klinische ontwikkelingen en andere gebieden van de wetenschap over het leven. Dit is een gevoelige test die een doelmolecuul in biologische vloeistoffen of oplossingen ontdekt en kwantitatief bepaalt. ELISA kan worden uitgevoerd in verschillende formaten en platformen. Hoewel het antilichaam dat voor het doel specifiek is, het belangrijkste reagens van ELISA is, zijn andere componenten ook van het allergrootste belang voor de effectiviteit van de test. Onze jarenlange uitgebreide ervaring op het gebied van de biochemie van antilichamen en antigenen, van functionele analysen, van de productie van recombinante eiwitten, van het kweken van hybridoma’s, van de zuivering van antilichamen, hun karakterisering en conjugatie, stelt ons in staat om een volledig geoptimaliseerde en gevalideerde ELISA te waarborgen voor het eindgebruik ervan.

MEER DETAILS
TERUG NAAR BOVEN


TYPES ELISA

  • direct
  • indirect
  • sandwich
  • concurrerend
  • remmend

METHODEN VAN SIGNAALDETECTIE BIJ ELISA

  • absorptie op het zichtbare gebied
  • fluorescentie
  • luminescentie

ONTWERP VAN ELISA BEVAT EEN KEUZE:

  • testformaat
  • antilichaam of een paar antilichamen
  • standaarden
  • chemie van het aanbrengen van antigeen/antilichaam op de plaat
  • buffers voor het blokkeren en spoelen
  • strategie van detectie
  • reagentia voor detectie

OPTIMALISERING VAN ELISA BEVAT EEN TEST VAN:

  • concentraties van antistoffen, monsters en buffers
  • protocollen inzake het aanbrengen van het antigeen/antilichaam
  • protocollen van detectie
  • dubbele titratie (titratie type schaakbord, chessboard titration)

VALIDERINGSPARAMETERS VAN ELISA WORDEN GETEST:

  • betrouwbaarheid / nauwkeurigheid / juistheid
  • onzekerheid
  • limiet van kwalitatieve beoordeling
  • lineariteit van het gebied van verdunning
  • reproduceerbaarheid van parallellen
  • kwaliteitscontrole van kalibrators
  • selectiviteit
  • stabiliteit van het monster

INFO VERBERGEN
LEES MEER
Diensten

Labeling en conjugatie van eiwitten

Gelabelde eiwitten laten ons specifieke moleculaire interacties met een hoge gevoeligheid bestuderen in complexe biologische systemen. Ze zijn belangrijke reagentia in talrijke biologische toepassingen zoals analysen, eiwitzuivering, het onderzoeken van expressies van mRNA’s, het onderzoeken van weefsellokalisatie, flowcytometrie, klinische visualisatie en andere. De kwaliteit van de gelabelde eiwitten is van het allergrootste belang voor het verkrijgen van stabiele en betrouwbare gegevens. Hoewel de procedures van labeling simpel en eenvoudig lijken, moeten de meeste van deze nog worden aangepast, rekening houdend met de aard van het eiwit, om de gewenste resultaten te bereiken. Mogelijke problemen tijdens de procedures van labeling bevatten het verlies van eiwit als gevolg van precipitatie, de manier van de behandeling van het eiwit en de instabiliteit ervan, een niet-reproduceerbare verhouding van het label en het eiwit, een onvolledige verwijdering van niet-geconjugeerde sonde en een onvoldoende karakterisering van het eiwit voor en na de labeling. Bovendien bestaan er nu nieuwe technologieën van de site gerichte labeling die in het proces van de labeling van expressie en de zuivering van het eiwit moeten worden geïntegreerd. We hebben ruime ervaring met verschillende methoden van eiwit-labeling en dus zijn zeker dat we u hoogwaardige gelabelde reagentia voor uw volgende toepassingen kunnen leveren.

MEER DETAILS
TERUG NAAR BOVEN


NIET-SELECTIEVE LABELING VAN EIWITTEN

  • biotinylering met inclusieverhoudingen die bepaald worden door de analyse op basis van HABA (4'-hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid)
  • conjugatie met fluorescerende sondes met inclusieverhoudingen die bepaald worden volgens fluorescentie
  • andere chemische groepen (bijvoorbeeld sulfotags, kleurstoffen) met inclusieverhoudingen die bepaald worden door spectroscopie op de UV- en zichtbare gebieden
  • conjugatie van enzymen met inclusieverhoudingen die bepaald worden volgens de activiteit van enzymen

SITE-SPECIFIEKE LABELING

  • C-terminus labeling met “Sortagging” (met sortase gemedieerde transpeptidatie)
  • N-terminus labeling met behulp van “Sortagging”
  • labeling volgens de sites van glycosylering

LABELING MET BEHULP VAN KLIKCHEMIE (CuAAC - Cu catalyzed alkyne azide cycloaddition, Cu-gekatalyseerde toevoeging van alkyn-azide cyclus)

  • azide-gemodificeerde eiwitten en/of polysachariden
  • alkyn-gemodificeerde eiwitten en/of polysachariden
  • Cu (I)-gekatalyseerde Click-labeling
  • niet-katalytische Click-labeling
  • keuzen van Click-partners binnen de bestelling, met inbegrip van dubbele labels
  • gebruik van in situ
  • conjugatie en detectie van eiwitten

IMMOBILISEREN VAN BIOMOLECULEN OP EEN VASTE DRAGER

  • site-specifieke gerichte immobilisatie op een chip
  • conjugatie van eiwit met een sorbent voor chromatografie

INFO VERBERGEN
LEES MEER
Diensten

Verwijderen en testen van endotoxinen

Het verwijderen van endotoxinen uit biologische oplossingen is van het allergrootste belang voor veel toepassingen, zowel in vivo als cellulair, omdat endotoxinen de cellulaire reacties verstoren. Endotoxinen zijn liipopolysachariden die zich in de celwand van gramnegatieve bacteriën bevinden. Endotoxinen komen bacteriën vrij tijdens de lyse. Het toxische effect van endotoxinen wordt bepaald door hun interactie met specifieke receptoren op immuuncellen, wat leidt tot het vrijkomen van hoge concentraties van cytokinen en andere moleculen die van immunologisch belang zijn. Omdat toevallige endotoxinen aanwezig zijn in de lucht, water, op het glaswerk in het laboratorium en niet kunnen worden verwijderd door eenvoudige sterilisatie, is dit bijna onmogelijk om oplossingen zonder endotoxinen te verkrijgen zonder de procedure van hun verwijdering. Voor elk project inzake de verwijdering van endotoxinen is een stadium van de ontwikkeling van het protocol nodig, die rekening houdt met de biofysische eigenschappen van het doelmolecuul, het eindgebruik van het monster en het gewenste recept. Gedurende veel jaren ontwikkelen we succesvol protocollen voor het verwijderen van endotoxinen om te voldoen aan de strenge eisen voor de uiteindelijke residuen van endotoxinen. We zijn zeker dat we uw project in verband met het verwijderen van endotoxinen tot een succes kunnen maken.

MEER DETAILS
TERUG NAAR BOVEN


VERWIJDEREN VAN ENDOTOXINEN UIT WATEROPLOSSINGEN OP UW VERZOEK:

  • eiwitten
  • DNA
  • peptiden
  • biomassa

DE METHODEN ZIJN GEBASEERD OP:

  • lading
  • hydrofobe eigenschap
  • combinatie van de lading en de hydrofobe eigenschap
  • affiniteit met liganden
  • grootte

BIJZONDERHEDEN VAN DE DIENST:

  • het verlies van het eiwit wordt geminimaliseerd door de juiste methode voor de verwijdering van endotoxinen en de optimalisatie ervan
  • de schalen variëren van mg tot g van het doelmolecuul
  • monsters die vrij van endotoxinen zijn, worden gesteriliseerd en verdeeld in meerdere aliquots voor het gemak
  • monsters worden geleverd in een buffer die compatibel is met de toepassing
  • de termijnen van de werken zijn in de meeste gevallen minder dan 1 week – vraag een offerte aan voor de analyse inzake endotoxinen
  • detergent-compatibele r-factor C-fluorescentietest
  • detecteerbare niveaus zijn minder dan 0,01 EU/ml
  • kinetische LAL-test en andere analysen voor endotoxinen zijn beschikbaar

INFO VERBERGEN
LEES MEER
Diensten

Ontwikkeling en productie van antistoffen

Gedurende de laatste 30 jaar zijn antilichamen zeer belangrijke reagentia geworden in onderzoeken, diagnostiek en geneeskunde. Deze klasse moleculen wordt momenteel veel gebruikt in veel gebieden van biomedische onderzoeken, zoals immuniteitstesten (Western blot, ELISA enzovoort), de zuivering van eiwitten, de identificatie van eiwitten en het onderzoek van interacties eiwit-eiwit. Veel commerciële diagnostische sets bevatten antilichamen als de meest belangrijkste componenten. Momenteel zijn er 75 monoklonale antistoffen of hun derivaten die zijn goedgekeurd door de Amerikaanse FDA, en veel andere antistoffen worden getest in klinische onderzoeken. Elk project met betrekking tot het creëren van antilichamen vereist een individuele benadering om alle feiten over het antigeen te verzamelen en de eigenschappen van het uiteindelijke antilichaam te bepalen. We hebben ruime en jarenlange ervaring in de ontwikkeling en productie van antistoffen voor onze klanten. We zullen uw project in verband met de ontwikkeling van antilichamen zorgvuldig plannen om de gewenste resultaten te bereiken.

MEER DETAILS
TERUG NAAR BOVEN


ZUIVERING VAN ANTISTOFFEN UIT BIOLOGISHE BRONNEN

  • alle isotypen van antilichamen van welk soort dieren dan ook
  • verwijderen van endotoxinen uit oplossingen van antilichamen
  • conjugatie van antilichamen met fluorescerende kleurstoffen of enzymen
  • karakterisering van antilichamen met de ELISA-methode en andere analysen

VERKRIJGEN VAN RECOMBINANTE ANTILICHAMEN IN EXPRESSIESYSTEMEN VAN ZOOGDIEREN DOOR MIDDEL VAN TIJDELIJKE OF STABIELE TRANSFECTIE


VERKRIJGEN VAN MONOKLONALE ANTILICHAMEN UIT HYBRIDOMEN CELLIJNEN


VERKRIJGEN VAN POLYKLONALE ANTILICHAMEN

  • ontwikkeling van een antigeen met immunogene eigenschappen
  • generatie, productie en zuivering van antigenen
  • analyse van het bloedserum op specificiteit door middel van ELISA en/of Western blotting
  • zuivering van antistoffen uit bloedplasma

PRODUCTIE VAN SINGLE-CHAIN ANTILICHAMEN (scFv) en Fab-FRAGMENTEN in E. COLI

  • ontwerp van expressieconstructie
  • expressie in E. coli en de optimalisatie ervan
  • zuivering van antistoffen

GENERATIE VAN FRAGMENTEN Fab EN (Fab)2 UIT ANTILICHAMEN VAN VOLLEDIGE LENGTE

  • optimalisatie van de enzymatische oplossingsreactie
  • verwijderen van fragmenten uit de H-strand
  • zuivering van Fab en (Fab)2

FAAGDISPLAY VOOR HET GENEREREN VAN MONOKLONALE ANTILICHAMEN

  • het genereren van de bibliotheek van de faagdisplay van antilichamen van geïnfecteerde/zieke patiënten of van met een antigeen geïmmuniseerde dieren
  • panning en screening van de faagdisplay
  • sequentieanalyse
  • genereren van scFv, Fab of hele immunoglobulinen in verschillende systemen van expressie

KARAKTERISERING VAN ANTILICHAMEN INZAKE SPECIFICITEIT EN SELECTIVITEIT


INFO VERBERGEN
LEES MEER

Contact Us

* Deze velden zijn verplicht.

 

TERUG NAAR BOVEN