Nossos Serviços de expressão proteica incorporam os mais recentes desenvolvimentos em tecnologias de expressão de bactérias, baculovírus e mamíferos para garantir que sua produção de proteínas recombinantes seja eficiente e econômica. Oferecemos uma série de Serviços de expressão proteica projetados para atingir os objectivos específicos, que vão desde a expressão de proteínas rotuladas para a pesquisa até a produção de biofármacos para o uso clínico. Sua Expressão proteica personalizada será otimizada pela engenharia de uma construção de expressão com um inserto de ADN otimizado por códon, um promotor forte, um sítio de ligação de ribossomos eficiente, um alto número de cópias e combinando-o com um receptor apropriado. O alto nível de expressão proteica também depende da estabilidade, solubilidade e via de dobramento do produto proteico. Consequentemente, otimizaremos esses parâmetros de expressão protéica quando tal otimização for necessária.
A qualidade dos materiais de base resultantes da Fermentação em grande escala geralmente determina a estratégia de purificação ou até mesmo o sucesso da purificação. Nossos Serviços de cultura de células visam alcançar a produção máxima de r-proteínas através da otimização dos processos de fermentação e poderia ser um passo de purificação muito importante por si mesmo. O tempo e o esforço investidos nesta fase geralmente resultam em protocolos de purificação substancialmente mais curtos e maiores rendimentos de r-proteína activa. Nossa experiência com várias linhas celulares de alta produção, modos de crescimento de culturas de células, formulações de meios, métodos de extracção, fracionamento e enriquecimento de proteínas nos permite projetar o processo de produção mais ótimo para seus materiais de base.
Nossas habilidades na Purificação de proteínas personalizadas foram produto do trabalho de muitos anos com medicamentos protéicos, alvos farmacológicos, componentes do sistema biológico e reagentes bioquímicos. Todos os Serviços de purificação de proteínas começam com a análise das propriedades físico-químicas e biológicas de uma proteína alvo, o que resulta em desenvolvimento de procedimentos adaptados para sua extração, purificação e caracterização. Nossa estratégia de purificação visa alcançar uma preparação de proteína ativa homogênea em duas ou três etapas de purificação. Este objetivo é alcançado por uma seleção e otimização exaustivas da etapa de captura, a incorporação de uma etapa de filtração em gel para eliminar agregados, produtos de degradação e outros contaminantes, selecção de condições dos tampões que estabilizam a atividade biológica e impedem a degradação do produto. Trabalhamos rotineiramente com anticorpos, antígenos, enzimas, fatores de crescimento, proteínas de ligação ao ADN, proteínas de membrana, proteínas do sangue e muito mais. Embora a maioria das proteínas requer uma abordagem individual, temos a certeza de que podemos lidar muito bem com sua proteína. Vamos purificá-la de forma econômica, caracterizá-la de acordo com suas especificações e entregá-la de forma activa e compatível com a aplicação.
A SDS-PAGE e/ou técnica dot/Western blot são rotineiramente usadas para a análise de fracções. A pureza final da proteína é determinada pela densitometria a partir de géis tingidos com Coomassie. Os produtos finais são fornecidos com um certificado de análise, relatório de purificação e, se aplicável, um registo de lote
A caracterização analítica assegura a identidade, pureza, integridade estrutural e conformacional, assim como a função da proteína. Realizamos uma série de análises rotineiras de proteínas em todas as etapas do projeto. Se necessário, podemos enviar suas amostras para métodos adicionais de caracterização. Também oferecemos serviços especializados de caracterização de proteínas para as proteínas purificadas.
Oferecemos nossa experiência em Ensaios funcionais e desenvolvimento do ensaio para estudos mecanísticos detalhados de uma proteína alvo, medições bioanalíticas e rastreio de alto rendimento. Uma vez que caracterizamos completamente os materiais para os quais um ensaio é desenvolvido, nossos ensaios maximizaram as janelas de sinal, a baixa variabilidade e são econômicos. Esses ensaios podem ter várias aplicações, como a análise de atividades enzimáticas, a ligação de pequenas moléculas a proteínas, as interações proteína-proteína e as interações ácido nucleico-proteína. Além disso, oferecemos nossos serviços para a terceirização de seus ensaios ou estudos mecanísticos.
O Ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) é um ensaio amplamente utilizado em diagnósticos, descoberta de drogas, desenvolvimento clínico e outras indústrias da ciência natural. Este é um ensaio sensível que detecta e quantifica uma molécula alvo em fluidos ou soluções biológicas. O ELISA pode ser realizado em vários formatos e plataformas. Embora um anticorpo alvo específico seja o aspecto central de um ELISA, outros componentes também são fundamentais para o rendimento do ensaio. Nossa experiência integrada e contínua na bioquímica de anticorpos e antígenos, ensaios funcionais, produção de proteínas recombinantes, cultura de células de hibridoma, purificação de anticorpos, caracterização e conjugação nos permite oferecer um ELISA totalmente otimizado e validado para sua aplicação final prevista.
As proteínas rotuladas nos permitem estudar interações moleculares específicas com alta sensibilidade nos sistemas biológicos complexos. Estes são reagentes importantes em inúmeras aplicações biológicas, como ensaios, purificações, conjuntos de proteínas, estudos de localização, citometria de fluxo, imagens clínicas e muito mais. A qualidade das proteínas rotuladas é fundamental para obter dados coerentes e confiáveis. Embora os procedimentos de rotulagem pareçam ser simples e fáceis, a maioria deles ainda precisa ser ajustada para levar em consideração a natureza de uma proteína a fim de alcançar os resultados desejados. Os possíveis problemas que podem surgir durante os procedimentos de rotulagem incluem perdas de proteína devido à precipitação, manipulação e instabilidade da amostra, proporção de rótulo para proteína incompatível, eliminação incompleta de uma sonda de rotulagem não conjugada e má caracterização de proteínas antes e depois da rotulagem. Além disso, surgiram novas tecnologias para a rotulagem dirigida que exigem integração da expressão e purificação de proteínas no processo de rotulagem. Temos uma vasta experiência com várias técnicas de rotulagem de proteínas e temos a certeza de que podemos fornecer reagentes rotulados de alta qualidade para suas aplicações posteriores.
A eliminação de endotoxinas das soluções biológicas é fundamental para muitas aplicações in vivo e baseadas em células, pois interfere com a resposta biológica. As endotoxinas são polissacarídeos que se encontram na parede celular externa de bactérias gram-negativas. As bactérias liberam endotoxinas no momento da lise. O efeito tóxico das endotoxinas é desencadeado por sua interação com receptores específicos nas células imunes, resultando na liberação de altas concentrações de citocinas e outras moléculas de importância imunológica. Uma vez que a endotoxina adventícia está presente no ar, na água e no equipamento de laboratório e não pode ser eliminada por uma simples esterilização, é quase impossível gerar soluções livres de endotoxina sem um procedimento de eliminação. Cada projeto de Eliminação de endotoxinas requer uma etapa de desenvolvimento de protocolo que leve em consideração as propriedades biofísicas de uma molécula alvo, a aplicação final da amostra e a formulação desejada. Durante anos, desenvolvemos com sucesso protocolos de Eliminação de endotoxinas para atender aos rigorosos requisitos da presença de endotoxinas. Temos a certeza de que podemos tornar o seu projeto de Eliminação de endotoxinas um sucesso.
Nos últimos 30 anos, os Anticorpos tornaram-se reagentes muito importantes na pesquisa, no diagnóstico e na medicina. Esta classe de moléculas é muito usada agora em numerosos campos da pesquisa biomédica, como os imunoensaios (Western blots, ELISA, etc.), a purificação de proteínas, a identificação de proteínas e os estudos de interação proteína-proteína. Muitos conjuntos de diagnóstico comerciais têm anticorpos como seus componentes fundamentais. Atualmente, existem 75 Anticorpos monoclonais ou seus derivados aprovados pela FDA (Administração de Medicamentos e Alimentos) e muitos mais estão sendo testados em estudos clínicos. Cada projeto de anticorpos requer uma abordagem personalizada que coleta todos os dados sobre um antígeno e define as propriedades do anticorpo final. Temos uma longa história no desenvolvimento e produção de anticorpos para nossos clientes. Planejaremos seu projeto de Anticorpos exaustivamente para alcançar os resultados desejados.